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生產(chǎn)方法

D-異抗壞血酸在自然界的分布尚無報(bào)道，市場(chǎng)銷售的異抗壞血酸均為人工合成。D-異抗壞血酸的生產(chǎn)方法主要有間接發(fā)酵、酶法、基因工程法、間接發(fā)酵法、直接發(fā)酵法四種。

間接發(fā)酵法

國內(nèi)外D-異抗壞血酸的生產(chǎn)普遍采用的是間接發(fā)酵法。間接發(fā)酵法生產(chǎn)D-異抗壞血酸是采用發(fā)酵與與合成相結(jié)合的方法。首先利用細(xì)菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化為2-酮基-D-葡萄糖酸（2-KGA），再以2-酮基-D-葡萄糖酸（2-KGA）或者2-酮基-D-葡萄糖酸鈣（2-KGCa）為起始原料經(jīng)酯化、酸化等工藝合成D-異抗壞血酸。

直接發(fā)酵法

通過在發(fā)酵培養(yǎng)基中接種真菌，可直接生產(chǎn)D-異抗壞血酸，能直接產(chǎn)生D-異抗壞血酸的菌種主要為青霉菌。直接發(fā)酵法的生產(chǎn)代謝途徑包含兩步：一是葡萄糖被葡萄糖氧化酶催化氧化成D-1，5葡萄糖酸內(nèi)酯，D-1，5-葡萄糖酸內(nèi)酯同時(shí)會(huì)轉(zhuǎn)化成D-1，4-葡萄糖酸內(nèi)酯，這是一步可逆反應(yīng)，由于D-1，5-葡萄糖酸內(nèi)酯在中性條件下不穩(wěn)定，會(huì)水解成葡萄糖酸；二是葡萄糖酸內(nèi)酯在葡萄糖酸內(nèi)酯氧化酶的作用下，轉(zhuǎn)變成D-異抗壞血酸，同時(shí)在轉(zhuǎn)化的過程中有個(gè)未知的含有1，5內(nèi)酯環(huán)的中間產(chǎn)物生成。

酶法

酶法是指在一定的溫度和酸度下，內(nèi)酯酶（如葡萄糖酸內(nèi)酯酶、內(nèi)酯脫氫酶等）可以將溶液中的2-KGA轉(zhuǎn)化為D-異抗壞血酸。采用酶法生產(chǎn)異抗壞血酸，盡管酶具有高效性和專一性，沒有底物的反饋抑制作用，反應(yīng)步驟簡單，但是葡萄糖酸內(nèi)酯酶比較難得，酶的活性及其性質(zhì)也并不清楚，酶的比率難以確定，且產(chǎn)率太低，工業(yè)應(yīng)用價(jià)值很低。

基因工程法

基因工程法是將青霉中的糖內(nèi)酯氧化酶的基因克隆到酵母中，并在酵母中表達(dá)，由此通過酵母來發(fā)酵生產(chǎn)D-異抗壞血酸?；蚬こ谭m然其產(chǎn)量還達(dá)不到工業(yè)化生產(chǎn)的要求，但是相對(duì)于酶法其產(chǎn)量大幅提高，且克服了鐵離子對(duì)青霉抑制作用這一難題，為異抗壞血酸的直接發(fā)酵的工業(yè)化做出了重要的一步。