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上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類齊全，且具有優(yōu)勢價格，歡迎新老客戶咨詢認(rèn)購。

產(chǎn)品詳細(xì)信息

名稱：網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒

規(guī)格： 20T/50T

品牌：上海滬崢

【用途】 用于網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

【操作步驟】

1.RNA提取 

(1) 取疑似病料（*、*、*、心臟、胸腺、法氏囊等）1~4g于無菌研缽，研磨并用PBS液稀釋成1：3乳劑，分裝1.5ml滅菌EP管，反復(fù)凍融2~3次，8000r/min離心5分鐘。（病毒培養(yǎng)液，只需凍融1次即可8000r/min離心5分鐘）

（2）取200uL上清液（或標(biāo)準(zhǔn)品Ｔ），移入新的1.5mL滅菌EP管中，加入200uLSR-I，漩渦振蕩混合均勻，靜置5min。

（3）加75uL TU-1，漩渦振蕩混合均勻，10000r/min離心5 min。

（4）將上清轉(zhuǎn)移到新的2 ml離心管（試劑盒內(nèi)提供）中，加入300 uL 異丙醇（1%冰乙酸），上下倒置6-8次，混合均勻。

（5）將步驟4中的混合液移入制備管中，并將制備管置于同一2 ml離心管，10000 r/min離心1min。

（6）棄濾液，將制備管置回到2 ml離心管中，加500 uL SR-II，室溫靜置1min，10000 r/min離心1 min。

（7）棄濾液，將制備管置回到2 ml離心管中，加700 uL SR-Ⅲ，10000 r/min離心1 min。

（8）將制備管置回到2 ml離心管中，10000 r/min離心1 min。

（9） 將制備管置于潔凈的1.5 ml離心管中（試劑盒內(nèi)提供），在制備管膜中央加40 uL TU-2， 室溫靜置1 min。10000 r/min離心1 min洗脫。洗脫液即為模板，即用或-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

 3 .PCR操作 

4.電泳

  配制1%瓊脂糖凝膠，取PCR產(chǎn)物5uL混合1uL TU-8，加樣于凝膠孔中，同時在相鄰孔加3uLTU-7，在120v 電壓下，1×TAE液中電泳15分鐘，在紫外成像儀下觀察結(jié)果。

【結(jié)果判定】如果為網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒感染陽性，則有約為280bp目的條帶，如果為網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒感染陰性，則無目的條帶。

網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒一步法RT-PCR診斷試劑盒

【注意事項】

1. 每次使用，開蓋之前請先瞬時離心，使試劑沉于管底。

2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫擱置太久。

3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū)，避免交叉污染。

4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說明書進行，由于操作失誤、移液器不精確、定時不準(zhǔn)確造成無結(jié)果情況，不予負(fù)責(zé)。

5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁，可用鑷子夾取。

6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。

動物疫病監(jiān)測是動物、動物產(chǎn)品質(zhì)量的重要保證，由法定的機構(gòu)和人員按國家規(guī)定的動物防疫標(biāo)準(zhǔn)，依法制定程序、方法和標(biāo)準(zhǔn)，對動物、動物產(chǎn)品及有關(guān)物品進行定期或不定期的檢查和檢測，并依據(jù)監(jiān)測結(jié)果進行處理的一種措施。動物疫病監(jiān)測離不開實驗室檢測技術(shù)，準(zhǔn)確、快速的檢測結(jié)果可為國家制定動物疫病預(yù)防控制規(guī)劃和疫病預(yù)警提供科學(xué)的依據(jù)。

二、實驗室常用檢測技術(shù)

（一）組織病理學(xué)檢測技術(shù)

 利用病理學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)，對染病組織進行切片觀察和免疫組化染色，開展對動物疫病病原的特異性診斷工作。包括病理學(xué)技術(shù)和免疫病理學(xué)技術(shù)。

1、病理學(xué)診斷技術(shù)。利用疫病引起的動物組織發(fā)生特征性的病變和基本病理變化對動物疫病進行診斷。

2、免疫病理學(xué)檢測技術(shù)。免疫組織化學(xué)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)，是免疫學(xué)與組織（細(xì)胞）化學(xué)相結(jié)合的一個分支學(xué)科，以免疫學(xué)的抗原、抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)，主要原理是用標(biāo)記的抗原（或抗體）對細(xì)胞（組織）內(nèi)的相應(yīng)抗體（抗原）進行定性、定位或定量檢測，經(jīng)過組織化學(xué)的呈色之后，用顯微鏡、電子顯微鏡、熒光顯微鏡觀察結(jié)果。