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組織細胞裂解液（含脫氧膽酸鈉） Cell and Tissue Lysis Buffer

貨號：ZK-PL4196

描述：組織細胞裂解緩沖液，為您提供完整的組織、細胞總蛋白制備方案，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用。裂解液中含有去氧膽酸鈉和EDTA，裂解得到的蛋白樣品可用于常規(guī)的Western、IP等實驗。

儲存：

4℃保存。

規(guī)格：

100ml  500ml

制備細胞裂解產物：

1.800g4℃離心5分鐘收集培養(yǎng)細胞，估計細胞離心后的體積（PCV,106cells=~20ul,107cells=~100ul PCV）；

2.每50～100ulPCV加入5倍體積組織細胞裂解緩沖液（250~500ul）,冰浴放置10分鐘，每隔5分鐘在漩渦混合儀上振蕩30秒；

3.12000g4℃離心10分鐘，將上清轉移到新的離心管中，即得細胞總蛋白產物；

注意：假如所得蛋白產物較為粘稠,可先95℃加熱5分鐘，迅速冰浴5分鐘，然后再進行步驟3

制備組織裂解產物：

1.取50-100mg組織在冰上剪成碎片，用預冷的PBS洗滌2次離心棄去PBS；

2.加入0.5-1ml預冷的組織細胞裂解緩沖液；

3.4℃用玻璃勻漿器勻漿20-40次，直到95％的細胞被破碎，然后在冰浴中放置10分鐘，并每隔5分鐘在漩渦混合儀上振蕩30秒；

4.12000g4℃離心10分鐘,將上清轉移到新的離心管中，即得組織總蛋白產物；

注意：假如所得蛋白產物較為粘稠，可先95℃加熱5分鐘，迅速冰浴5分鐘，然后再進行步驟4

說明：

1.在轉移上清液時不要吸入底部的沉淀物；

2.在做免疫沉淀時最好在實驗前進行蛋白的提取，以避免某些不穩(wěn)定蛋白的降解；

3.在該裂解緩沖液中未加入蛋白酶抑制劑，用戶可自行選擇進行添加。