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基本信息：
產(chǎn)品名稱：血糖含量微量法檢測試劑盒
測試方法: 微量法
規(guī)格 : 100管/96樣
貨號：GOY-01S6725
分類：糖代謝系列
測定意義：
哺乳動物血液中的葡萄糖稱為血糖，是其體內(nèi)糖的主要運輸形式。血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和的調(diào)節(jié)而保持相對穩(wěn)定，調(diào)節(jié)失衡時出現(xiàn)高血糖和低血糖。糖尿病、顱內(nèi)壓增加和脫水癥等均可引起高血糖；飯后，精神緊張也可出現(xiàn)生理性高血糖。相反，胰島β細胞增生或腫等，垂體、腎上腺皮質(zhì)和甲狀腺功能減退，以及嚴重肝病患者均可出現(xiàn)低血糖癥狀。此外，饑餓和劇烈運動可引起暫時的低血糖。

測定原理：

葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并產(chǎn)生過氧化氫；過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在505nm有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍綠色之前均可使用。
標準品：液體×1支（EP管中），2 μmol/mL酚標準液，4℃保存。
測定步驟：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30min，調(diào)節(jié)波長到510 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：取EP管，加入4μL標準品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A標準管。
5. 對照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸餾水，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
6. 測定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
其中標準管和空白管只需做一管，測定管和對照管每個樣均需做。
注意：空白管和標準管只需測定一次。產(chǎn)品僅用于科研
小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)ELISA試劑盒 ，英文名： DNMT3B ELISA Kit

人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA檢測試劑盒HumanCyclinDependeKinase5,CDK5ELISAKit 96T/48T

大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)免疫試劑盒 Rat Ulasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit

CLIAKitforVEGF-C(HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC)ELISAKIT人血管內(nèi)皮細胞生長因子C規(guī)格：48T/96T

免疫細胞化學HRP酶聯(lián)DAB完全間接檢測試劑盒(含一抗和HRP二抗)10次

ELISAKitFLU人流感病毒抗體IgG規(guī)格：48T/96T
小鼠維生素D3(VD3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat osteopoin (OPN) ELISA Kit 大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒

HumanlumicanELISAKit 人基膜聚糖(lumican)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞INSULI-ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
MLKL(Human mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit 人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh hnRNP R 異質(zhì)性核糖核蛋白R 規(guī)格 0.2ml

AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓0脂抗體IgA 96T

PCDHB6 英文名稱： 原鈣粘附蛋白β6抗體 0.1ml

Cofilin 英文名稱： 肌動蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體 0.1ml

Anti-Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
血糖含量微量法檢測試劑盒Anti-SSTR4/FITC 熒光素標記生長抑素受體4(SSTR4)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 基質(zhì)金屬蛋白酶-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

腸道肽蛋白2/小肽蛋白2抗體 Anti-PEPT2 0.1ml

phospho-Syntaxin 1a(Ser14) 英文名稱： 0酸化突觸融合蛋白1抗體 0.1ml

Ephrina1 英文名稱： 內(nèi)皮細胞受體蛋白酪酸激酶A抗體(壞死因子α誘導蛋白4) 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MYPT1 (Thr853) 0酸化肌球蛋酸酶抗體 規(guī)格 0.1ml

MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 基質(zhì)金屬蛋白酶-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定：
a. 參考下表使用96孔板加入各個組分，注意設置樣品孔和各種空白對照孔。
注意：加入反應啟動工作液后反應即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應啟動工作液的時間先后差異而導致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明：孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異，但為檢測結(jié)果的一致性，推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片，可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計算：
a. 百分率的計算：
參考如下計算公式計算百分率：
百分率＝[(A空白對照1－A空白對照2)－(A樣品－A空白對照3)] / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果沒有設置空白對照3，則可以把計算公式簡化為：
百分率＝(A空白對照1－A樣品) / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果計算出來的百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測定出來的百分率偏高，則需適當稀釋樣品；如果測定出來的百分率偏低，則需重新準備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義：在上述化酶藕聯(lián)反應體系中百分率為50% 時，反應體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位 (unit)。注意：SOD的活力單位的定義方式有很多種，不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進行適當換算。