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小鼠ABO組織血型系統(tǒng)轉(zhuǎn)移酶 (BGAT)ELISA試劑盒

研究ABO血型B亞型系統(tǒng)Bw亞型與B糖基轉(zhuǎn)移酶的關(guān)系.方法運用血型血清學鑒定方法鑒定1個家庭 2例ABO血型的Bw亞型,運用聚合酶鏈式反應的方法擴增糖基轉(zhuǎn)移酶1～7號外顯子,送到試劑公司測序.結(jié)果直接測序發(fā)現(xiàn)2例ABO血型的Bw亞型,其中 B糖基轉(zhuǎn)移酶基因第721位C> T的轉(zhuǎn)變,導致糖基轉(zhuǎn)移酶多肽鏈Arg241Trp的轉(zhuǎn)變.結(jié)論糖基轉(zhuǎn)移酶基因第721位的C> T的突變引起糖基轉(zhuǎn)移酶活性的消失或者減弱,導致Bw亞型.

ABO(H)血型抗原是人類主要的血型抗原,其抗原表位決定簇為特定的糖鏈結(jié)構(gòu),這些特定的糖鏈可以與多肽結(jié)合形成糖蛋白,或者與脂類結(jié)合形成鞘糖脂。ABO(H)抗原不僅存在于紅細胞表面,也廣泛分布于人體器官的上皮和內(nèi)皮細胞,周圍神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元以及母乳、唾液和尿液中。這些寡糖抗原與急性溶血性輸血反應以及骨髓和器官移植的免疫反應密切相關(guān)。越來越多的研究表明,這些抗原作為受體在各種、和寄生蟲感染,以及的轉(zhuǎn)移中扮演著重要的角色。ABO(H)血型抗原包括A抗原特征三糖、B抗原特征三糖和H抗原特征二糖,三種抗原表位決定簇。根據(jù)其生物合成途徑中二糖前體結(jié)構(gòu)的不同,ABO(H)抗原可以進一步分為5個亞型。這5種二糖前體分別為Galβ1-3GlcNAcβ1-R(Ⅰ型),Galβ1-4GlcNAcβ1-R(Ⅱ型),Galβ1-3GalNAcα1-R(Ⅲ型),Galβ1-3GalNAcβ1-R(Ⅳ型),Galβ1-4Glcβ1-R(Ⅵ型)。分別以這5種二糖前體為底物,在3種糖基轉(zhuǎn)移酶的催化下依次將3種不同的單糖引入到前體二糖的非還原末端就得到全部15種天然ABO(H)抗原結(jié)構(gòu)。ABO(H)血型抗原的重要生物學意義和重要性,使得其抗原的合成成為近60年來糖合成領域的一個熱點。目前,就ABO(H)抗原的合成已發(fā)展出許多不同的方法,如化學法合成、化學酶法合成、酶法合成以及全細胞發(fā)酵等?；瘜W合成策略的操作條件較為嚴格,需要繁瑣的保護、脫保護操作和大量的分離純化操作,因而導致合成總收率較低,難以實現(xiàn)大量合成以滿足其生物學功能的研究。酶法合成方面,酶的來源以及酶的底物專一性限制了其在復雜寡糖大量合成中的應用。全細胞發(fā)酵通常只能針對特定的單一抗原結(jié)構(gòu),且產(chǎn)物難以從混合物中得以純化。迄今為止,只有加拿大的Todd Lowary課題組通過化學合成實現(xiàn)了全部15種天然ABO(H)血型抗原的系統(tǒng)性合成。本論文成功的發(fā)展了一種多樣化導向的酶法模塊化組裝(enzymatic modular assembly,EMA)策略,實現(xiàn)了全部15種天然ABO(H)血型抗原結(jié)構(gòu)的系統(tǒng)性合成。本論文工作主要包括以下幾個方面:(1)通過化學合成或化學酶法合成,、快捷的實現(xiàn)了 5種二糖前體的大量合成。(2)分雖以 Tyβe Ⅰ 二糖(Galβ1-3GlcNAcβProN_3),Tyβe Ⅱ二糖(Galβ1-4GlcNAcβProN_3),Tyβe Ⅲ二糖(Galβ1-3GalNAcαProN_3),Tyβe Ⅳ二糖(Galβ1-3GalNAcβProN)和Type Ⅵ二糖(Galβ1-4GlcβProN_3)為受體,運用酶法模塊化組裝策略,通過一步平行反應,完成了全部5種天然H抗原的合成。(3)以5種H抗原為受體,運用2個不同的酶法組裝模塊,分別平行合成了5種A抗原和5種B抗原。本論文的主要創(chuàng)新點包括以下兩個方面:(1)實現(xiàn)了全部15種天然ABO(H)血型抗原的系統(tǒng)性酶法合成。(2)發(fā)展了、快速的酶法模塊化組裝新策略,分別以5種二糖前體為受體,僅通過3步平行合成就實現(xiàn)了全部15種天然ABO(H)抗原的大量合成。