武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
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亞細(xì)胞定位方法-洋蔥亞細(xì)胞定位方法-思特進(jìn)
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
實驗室前期研究表明,將來自水稻黃單胞菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)的Harpin蛋白編碼基因hrf1轉(zhuǎn)化水稻,獲得的轉(zhuǎn)基因株系NJH12能夠提高對水稻稻瘟病、水稻白葉枯病和干旱的抗性。對NJH12表達(dá)芯片進(jìn)行分析,篩選出大量與受體植株有顯著差異表達(dá)的基因。 OsSsrl (Oryza sativa L. salt-sensitive related gene1, GeneBank登錄號為NM_001065574)是NJH12表達(dá)譜中的一個表達(dá)量上調(diào)基因,為了進(jìn)一步分析其序列特征、啟動子序列、亞細(xì)胞定位及在水稻不同組織和各種逆境脅迫下的表達(dá)模式,通過生物信息學(xué)手段、洋蔥表皮亞細(xì)胞定位和Real-Time PCR對其進(jìn)行研究。序列分析表明OsSsr1的開放閱讀框為2004bp,編碼一個由667個氨基酸組成并含有5個跨膜區(qū)的蛋白,該蛋白N端含有一個信號肽。其啟動子序列包含TGACG-motif、ABRE、 TCA-element、Box-W1、W box和Box S等多個與脅迫相關(guān)的順式作用元件。GFP融合表達(dá)顯示,OsSsrl蛋白定位于細(xì)胞膜。Real-Time PCR結(jié)果表明,OsSsrl基因在水稻不同不同組織中均有表達(dá),在葉部的表達(dá)量,其次為根,在幼穗中的表達(dá)量;OsSsrl表達(dá)水平受干旱、高溫、高鹽、低溫、機(jī)械傷害、稻瘟病菌、MeJA和ABA的誘導(dǎo)上調(diào)。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
蘿卜(Raphanus sativus L.)是一種重要的十字花科根菜類作物,具有較高的營養(yǎng)價值,在中國乃至世界都有廣泛種植。葡萄糖苷是一種重要的植物次生代謝產(chǎn)物,主要存在于蘿卜等十字花科植物中。硫苷及其降解產(chǎn)物在植物防御、風(fēng)味形成以及人類預(yù)防中起重要的作用,此外,它還具有作為生物的潛力。MYB轉(zhuǎn)錄因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成過程中的關(guān)鍵調(diào)控基因,其表達(dá)量的多少直接影響蘿卜中硫苷的含量和分布。調(diào)控基因的某些特性在擬南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有廣泛研究,然而在蘿卜研究領(lǐng)域關(guān)于MYB28和MYB29的分子特性、表達(dá)特征尚未見報道。因此,本以蘿卜品種'NAU-ZQH'為材料,通過比對擬南芥中MYB28和MYB29的序列與本實驗室蘿卜轉(zhuǎn)錄組序列,蘿卜中調(diào)控硫苷合成的兩個關(guān)鍵基因RsMYB28和RsMYB29,之后從亞細(xì)胞定位、轉(zhuǎn)錄活性和表達(dá)特征等多方面進(jìn)行研究,以期,增加對蘿卜中RsMYB28和RsMYB29基因分子特性和表達(dá)特征的認(rèn)識,為后期通過基因改良培育出硫苷含量較高的蘿卜新品種提供理論基礎(chǔ)。
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洋蔥(Allium cepa L.)為百合科蔥屬2年生植物,可以加體,抑制,緩解,抵御,改善眼睛模糊,是一種營養(yǎng)價值與保健價值都很高的蔬菜。迄今,洋蔥在我國已廣泛栽培,但多年來連續(xù)重茬種植,加之氣候環(huán)境的影響,導(dǎo)致洋蔥鱗莖腐爛害發(fā)生廣泛,嚴(yán)重影響了洋蔥的產(chǎn)業(yè)發(fā)展與品質(zhì)性狀,降低了農(nóng)民的利益,洋蔥的抗病材料選育成為了急需解決的問題。為此,本試驗選取腐爛洋蔥為試材,分離致病菌,以形態(tài)學(xué)特征結(jié)合分子生物學(xué)方法鑒定其種類;利用人工接種鑒定方法篩選接種方案;對37份洋蔥材料進(jìn)行抗病性鑒定,從而為洋蔥的抗病育種提供參考,為洋蔥病害的防治提供依據(jù)。
