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實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

技術(shù)原理:

DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

甲醇/二氯甲烷(1:1)中苯并[b]熒蒽溶液 2ml Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中苯并[a]蒽溶液 2ml Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯甲烷(1:1)中苯并[a]芘溶液 2ml Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟甲腈溶液（無證書） 1mL Aeromonas punctata斑點氣單胞菌PCR試劑盒

丙酮中氟蟲腈硫醚溶液（無證書） 1mL Aeromonas punctata斑點氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟蟲腈砜溶液（無證書） 1mL Aeromonas punctata斑點氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中甲拌磷亞砜溶液（無證書） 1mL Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌PCR試劑盒

丙酮中甲拌磷砜溶液（無證書） 1mL Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中二甲戊樂靈溶液（無證書） 1mL Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中烯酰嗎啉溶液（無證書） 1mL Aeromonas sobria溫和氣單胞菌PCR試劑盒

丙酮中噻蟲嗪溶液（無證書） 1mL Aeromonas sobria溫和氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟啶脲溶液（無證書） 1mL Aeromonas sobria溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中蟲螨腈溶液（無證書） 1mL Aeromonas spp.氣單胞菌通用PCR試劑盒

丙酮中嘧菌酯溶液（無證書） 1mL Aeromonas spp.氣單胞菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽溶液（無證書） 1mL Aeromonas spp.氣單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
海螵蛸LAMP鑒定試劑盒圖片矮壯素/氯化氯代膽堿/稻麥立/氯化-2-氯-N,N,N-三甲基乙胺/三西/西西西/2-氯-N,N,N-三甲基乙銨氯化物/(2-氯乙基)三甲基氯化銨/氯化矮壯素/2-氯乙基三甲基氯化銨/二氯膽堿/氯化氯膽堿/氯化三甲基(2-氯乙基)銨鹽/Chlormequat chlorideBR，98%250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，999-81-5RT

中文名稱： 矮壯素

其他名稱： 氯化氯代膽堿；稻麥立；氯化-2-氯-N,N,N-三甲基乙胺；三西；西西西；2-氯-N,N,N-三甲基乙銨氯化物；(2-氯乙基)三甲基氯化銨；氯化矮壯素；2-氯乙基三甲基氯化銨；二氯膽堿；氯化氯膽堿；氯化三甲基(2-氯乙基)銨鹽

英文名稱： Chlormequat chloride

其他名稱： (2-Chloroethyl)trimethylammonium chloride

產(chǎn)品規(guī)格： BR，98%

包 裝： 250克

CAS號：999-81-5

C5H13Cl2N=158.07

級別：BR

含量：≥98.0%

PH：3.5～7.5

性狀：至淺黃色結(jié)晶粉末或塊狀物。熔點245℃（部分分解）。易溶于水，在常溫下飽和水溶液濃度可達80%左右。不溶于苯、二甲苯、無水乙醇，溶于丙醇。有魚腥臭，易潮解。在中性或微酸性介質(zhì)中穩(wěn)定，在堿性介質(zhì)中加熱能分解

用途：生化研究。一種優(yōu)良的植物生長調(diào)節(jié)劑，可用于小麥、水稻、棉花、煙草、玉米及西紅柿等作物，抑制作物細胞伸長，但不抑制細胞分裂，能使植株變矮，桿莖變粗，葉色變綠，可使作物耐旱耐澇，防止作物徒長倒伏，抗鹽堿，又能防止棉花落鈴，可使馬鈴薯塊莖增大。

保存：RT

24-表油菜素內(nèi)酯/蕓苔素內(nèi)酯/八仙豐產(chǎn)素/(22R，23R,24R)-2α,3α,22,23-四羥基-24-甲基-5α-膽甾-6-酮/(22R,23R,24R)-2α,3α,22,23-四羥基-β-高-7-氧雜-5α-麥角甾-6-酮/布拉西諾內(nèi)酯/24-Epicastasterone高純，95%100毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，78821-43-9保存：-20℃

500毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： 24-表油菜素內(nèi)酯

其他中文名稱： 蕓苔素內(nèi)酯；八仙豐產(chǎn)素；(22R，23R,24R)-2α,3α,22,23-四羥基-24-甲基-5α-膽甾-6-酮；(22R,23R,24R)-2α,3α,22,23-四羥基-β-高-7-氧雜-5α-麥角甾-6-酮；布拉西諾內(nèi)酯

英文名稱： 24-Epicastasterone

其他英文名稱： (22R,23R,24R)-2α,3α,22,23-tetrahydroxy-24-methy-B-7-oxa-5α-cholestan-6-one

產(chǎn)品規(guī)格： 高純，95%

包 裝： 100毫克/500毫克

CAS號：78821-43-9

C28H48O6=480.68

級別：High Purity Grade

含量：≥95.0%

熔點：256～258℃

干燥失重：≤0.7%

性狀：結(jié)晶粉末?？扇苡诩状?、乙醇、四氫呋喃、丙酮等有機溶劑。水中溶解度5mg/L。

用途：生化研究。在低濃度下（10-5～10-6mg/L）能顯示各種活性，其增加植物的營養(yǎng)體生長和促進受精的作用。現(xiàn)已從幾十種植物體中分離出這類化合物，含量很低，如植物體中含有吲哚乙酸（IAA）和脫落酸（ABA）分別約為2mg/kg和60mg/kg，而蕓苔素內(nèi)酯僅0.1mg/kg。 用0.05～0.5mg/L蕓苔素內(nèi)酯對小麥浸種24h，促進根系和株高；分蘗期進行葉片施肥，增加分蘗數(shù)；也可在孕穗期以0.01～0.02、0.01～0.02（750L/ha次）、0.01～0.04mg/L（750L/ha次）藥液噴霧處理或浸種